ПЦР гепатита B

Содержание
  1. Анализ ДНК и ПЦР вируса гепатита В, значения и расшифровка показателей исследования, норма
  2. Патология и её признаки
  3. Подготовка к анализу
  4. Как проходит исследование
  5. Расшифровка результатов
  6. Особенность полимеразной цепной реакции
  7. Общие цели ПЦР
  8. Преимущества метода
  9. Днк вируса гепатита в: расшифровка количественного исследования
  10. Виды вируса
  11. Гепатит В
  12. Что такое ДНК вируса гепатита b количественное определение
  13. Выявление ДНК НВV методом ПЦР
  14. При каких заболеваниях делается ДНК вируса гепатита b количественное определение
  15. Срок выполнения анализа на ДНК вируса гепатита b количественным способом
  16. К каким докторам следует обращаться для консультаций
  17. Исследования на вирус гепатита В (ИФА и ПЦР)
  18. Оценка результатов исследования
  19. Антитела к ядерному антигену вируса гепатита В JgG (анти-HBcAg JgG)
  20. Антиген «е» вируса гепатита В (HBeAg)
  21. Антитела к антигену «е» вируса гепатита В (anti-HBeAg)
  22. Обнаружение вируса гепатита В методом ПЦР (качественно)
  23. Обнаружение вируса гепатита В методом ПЦР (количественно)
  24. Пцр на гепатит в качественный
  25. Суть ПЦР диагностики
  26. ПЦР количественный
  27. ПЦР качественный
  28. Как подготовиться к обследованию?
  29. Количественный анализ ПЦР на гепатит В: расшифровка, норма, ДНК

Анализ ДНК и ПЦР вируса гепатита В, значения и расшифровка показателей исследования, норма

ПЦР гепатита B

Исследования ДНК и ПЦР вируса гепатита В являются самыми чувствительными анализами, которые позволяют обнаружить в тканях печени молекулярные следы ДНК, идентифицирующие наличие вируса. Суть метода заключается в многократном копировании фрагмента ДНК, принадлежащего возбудителю болезни.

ПЦР гепатита типа В — это полимеразная цепная реакция внешнего химического реагента с исследуемым биологическим материалом, направленная на выявление молекул вирусного ДНК в крови и их количественных показателей на единицу объёма. Анализ назначается в следующих случаях:

  • при возникновении признаков гепатита В у пациента;
  • во время диагностических мероприятий при микст-гепатитах;
  • для уточнения эффективности терапии.

Для ПЦР анализа делается забор венозной крови. Перед исследованием необходимо воздержаться от приёма пищи примерно 8 часов.

Нормальным результатом при выявлении ДНК у вируса считается показатель «не обнаружен». Он означает, что вирус в крови отсутствует или его содержание незначительное.

Окончательный диагноз может выставить только специалист на основании комплексного биохимического и иммунологического анализа кровяной плазмы на гепатит типа B. Врач назначает курс терапии.

Самолечение влечёт за собой слишком большой риск.

Для ПЦР-анализа делается забор венозной крови

Метод ПЦР даёт возможность выявить ДНК возбудителя даже при минимальном его присутствии в отобранной пробе крови. Кроме того, анализ позволяет обнаружить антигены, которые уже выработались на вирус. Каждый из антигенов свидетельствует об определённой стадии болезни:

  • HBsAg — вирус присутствует в данный момент.
  • Анти-HBcor — возбудитель в настоящее время отсутствует, но имелся в прошлом.
  • Анти-HBs — в крови имеются антитела к гепатиту B (как вариант — герпесу, ВИЧ, хламидиозу, микоплазмозу, кандидозу, туберкулёзу, клещевому энцефалиту и многим другим болезням).

Патология и её признаки

Гепатит B или HBV — это вирусная инфекция, поражающая клетки печени. Она опасна не только непосредственным воздействием на паренхиму органа, ослабляющим барьерную функцию и общий иммунитет. Возможны и более тяжёлые последствия, такие как цирроз печени и возникновение злокачественных новообразований.

HBV передаётся через кровь человека, инфицированного гепатитом, его экскременты, через контакты со слизистыми оболочками, особенно при половом акте, повреждениями кожи, через нестерильные шприцы при переливании крови или при полостных операциях. Возможно заражение новорожденного его больной матерью при прикосновении к трещинам на её сосках.

Для гепатита B характерны следующие симптомы:

Непривычная утомляемость

  • нарастающая усталость при небольших нагрузках;
  • непривычная утомляемость;
  • тяжесть в области правого подреберья;
  • пониженный аппетит, тошнота;
  • желтушность кожных покровов, склер глаз;
  • светлый кал;
  • тёмная моча;
  • болезненные ощущения в суставах.

Инкубационный период, после которого начинают проявляться эти признаки, составляет от месяца до полугода. Это срок накопления клеток вируса в печёночном кровотоке. Когда их концентрация доходит до критической массы, вирус прорывает мембраны гепатоцитов и продолжает размножаться уже внутри клеток. В результате клетки печени гибнут, развивается цирроз, который, при отсутствии должных терапевтических мер, приводит пациента к летальному исходу. Своевременный анализ крови на ПЦР и ДНК гепатита B позволяет избежать негативных.

Показаниями к ПЦР являются:

  • положительный тест на ДНК, подтверждающий диагноз — гепатит B;
  • острый и хронический гепатит;
  • микст-гепатиты;
  • количественное определение вируса в кровяной сыворотке;
  • разработка тактики эффективной терапии.

Подготовка к анализу

Перед процедурой необходимо 15-20 минут полного покоя

Подготовка к диагностике с помощью ПЦР определяется видом биоматериала. Так кровь и мочу сдают только в первой половине дня, натощак. Также берутся мазки и соскобы из урогенитальной области. Ограничением для женщин является только менструация. Для обоих полов ограничиваются половые контакты накануне исследований.

Результаты ПЦР можно будет считать достоверными только при правильной подготовке пациента к процедуре. Это исследование подразумевает соблюдение следующих условий:

  • полный душевный комфорт, отсутствие всяких волнений. Для обеспечения этого анализ можно сдать даже дома. Нужно только вызвать к себе врача с соответствующим оборудованием;
  • воздержание от пищи, алкоголя, курения, физической активности минимум за 8-12 часов перед анализом, иначе данные исследования будут искажены;
  • 15-20 минут полной релаксации перед забором крови;
  • прекращение приёма лекарственных препаратов (если это не представляется возможным, лаборатория должна быть предупреждена);
  • детям в возрасте до пяти лет в течение получаса перед анализом необходимо давать пить кипячёную воду маленькими порциями.

Как проходит исследование

В основе анализа ПЦР лежат принципы, которыми пользуется молекулярная биология.

Они заключаются в использовании специальных ферментов, расщепляющих и копирующих участки ДНК и РНК возбудителя инфекции, который обнаружен в крови.

После проведения этой операции, полученные образцы идентифицируются по базе данных, имеющихся в лаборатории. Одновременно выявляется вид инфекции и концентрация в крови возбудителя.

Амплификатор

Для проведения исследования используется амплификатор — термостат, способный нагревать и охлаждать пробирки с биоматериалом. Это необходимо для активации репликационных процессов. От точности температурных параметров зависит достоверность анализа.

Расшифровка результатов

Позитивным результатом для пациента является лабораторное заключение «не обнаружено». Оно означает отсутствие в крови ДНК гепатита B. В цифровом выражении это примерно 120 МЕ/мл, или 200 копий на такую же единицу объёма крови. Данное значение — норма. Требованием к биологическому материалу является то, что он не должен быть загрязнён.

Расшифровка других итогов анализа позволяет поставить следующие диагнозы:

  • Концентрация в крови ДНК гепатита B более 200 копий, но ниже критического уровня. Выраженная патология отсутствует.
  • Виремия в умеренной форме, доходящей до 500 копий на мл. Выбор лечения зависит от показателей биопсии печени и степени ухудшения её функций.
  • Повышенная концентрация вируса (более 500 копий/мл). Воспалительный процесс в активной фазе и требует интенсивной противовирусной терапии.
  • Предельная вирусная нагрузка (свыше 800 копий на мл.). Терапевтические мероприятия разрабатываются исходя из состояния больного и целиком направлены на его максимально возможное улучшение.

Для пациента хорошим результатом является заключение «не обнаружено»

Определение количественных показателей содержания ДНК гепатита B при проведении ПЦР является основой для выбора лечебного курса. Через три или шесть месяцев анализы проводятся снова, чтобы проверить эффективность противовирусной терапии.

Особенность полимеразной цепной реакции

В методике ПЦР используется два подхода к определению ДНК, принадлежащего вирусу: качественный и количественный.

Качественный подход подтверждает или отрицает наличие гепатита B. ПЦР назначается по просьбе пациента, подозревающего, что он заражён HBV-инфекцией или в том случае, когда ранняя диагностика иным способом не даёт однозначных результатов.

Если вирус гепатита B удаётся выявить не позже, чем через две недели после его проникновения в организм, положительный прогноз при лечении наиболее вероятен. В дальнейшем болезнь начнёт прогрессировать. Приблизительно через два месяца она перейдёт в хроническую фазу. Полное излечение в таком случае станет невозможным.

Количественный подход в ПЦР применяется только при обнаружении вируса. Он оценивает:

  • конкретную вирусную нагрузку на печень;
  • интенсивность прогрессирования заболевания;
  • устойчивость к препаратам противовирусной группы;
  • результативность лечения.

Эти показатели имеют прямое практическое значение. Особенно количественный показатель ДНК. От концентрации вируса в кровотоке печени зависит прогноз в острой фазе гепатита B.

Так низкая концентрация вирусных клеток почти полностью исключает переход острого гепатита в хронический. Такие больные не представляют опасности для окружающих.

Высокая вирусная нагрузка способствует хронизации патологического процесса и возможности заражения гепатитом людей, контактирующих с больным.

Существует также связь между концентрацией в крови генов вируса и цирротическим перерождением печени, и возникновением рака её паренхимы.

Анализы ПЦР помогают врачу обнаружить носители вируса

Результативность терапии противовирусными препаратами определяется по степени снижения концентрации ДНК гепатита B в печёночном кровотоке. Достаточным результатом считается уменьшение вирусной нагрузки в 1-2 раза при интенсивном лечении в течение от трёх месяцев до полугода. Более низкие показатели требуют изменения лечебного курса.

Прогноз развития патологии и назначения соответствующей терапии исходит из:

  • количественного объёма ДНК печёночного вируса в кровяной сыворотке;
  • сопутствующих биохимических показателей (например, уровня лейкоцитов в крови и содержания там билирубина);
  • маркеров вирусной инфекции;
  • результатов биопсии печени.

Общие цели ПЦР

Анализы с помощью полимеразной цепной реакции помогают врачу:

  • обнаружить носители вируса;
  • прогнозировать процесс развития гепатита типа B;
  • убедиться в переходе болезни в хроническую форму;
  • мониторить активность вируса на всех фазах развития;
  • выявить мутантные и скрытые штаммы гепатита B;
  • оценить эффективность лечения вируса при выборе определённой тактики и изменить её в случае недостаточной успешности.

Преимущества метода

В отличие от других анализов, которые применяются для диагностики гепатита B, ПЦР обладает:

Анализ ПЦР обладает исключительной чувствительностью

  1. Исключительной чувствительностью. Методика даёт возможность исследователю обнаружить возбудителя заболевания, даже если концентрация молекул его ДНК в крови минимальна.

    Это позволяет принять профилактические и лечебные меры на ранней стадии болезни, когда внешне она ещё не выражена никакими симптомами.

  2. Широким охватом возможностей. ПЦР способен выявить не только возбудителя вирусного гепатита B, но и ряд других патологий.
  3. Универсальностью подходов.

    Биоматериалом для исследований может быть кровь, слюна, клетки слизистых и кожных покровов.

  4. Оперативностью. Заключение будет готово ровно через день после забора крови (сам результат анализа получают не позже чем через 7 часов).
  5. Достоверностью.

    При соблюдении всех условий проведения ПЦР-методика никогда не показывает ложных данных.

  6. Ценовой доступностью исследования. По стоимости ПЦР лишь слегка превышает обычные анализы, использующие кровь как биоматериал.

Единственной издержкой исследования является его технологическая сложность.

Для качественного выполнения ПЦР требуется исключительно чистый биоматериал, современное оборудование и хорошо подготовленный персонал. Обращаться за диагностикой по этому методу предпочтительней в специализированные лаборатории.

Вирусный гепатит B относится к заболеваниям, полное излечение от которых представляется возможным только на самых ранних стадиях развития. Выявить болезнь именно в этой фазе помогает сверхчувствительная диагностика по методу ПЦР.

Первые симптомы, вызывающие подозрение на поражение печени вирусом, должны быть поводом для обращения к специалисту. Если диагноз подтвердится, лечение следует начинать немедленно.

Это улучшит прогноз и повысит вероятность поддержки печени в здоровом состоянии на долгие годы.

Источник: https://medgepatit.com/gepatit-b/dnk-i-ptsr-virusa-gepatita-b/

Днк вируса гепатита в: расшифровка количественного исследования

ПЦР гепатита B

Гепатит — патология печени воспалительного характера, появляющаяся из-за проникновения в орган вирусов или действия ядов, токсинов, приводящих к разрушению гепатоцитов (функциональных клеток органа). В нетяжёлой форме болезнь излечивается сама.

В сложных случаях приводит к серьёзным осложнениям: фиброзу, циррозу или онкологии. Выявляются пять разновидностей вирусного гепатита: A, B, C, D и E.

Разобраться, присутствует ли заболевание у данного человека, и в каком виде, можно по результатам специальных исследований.

Виды вируса

Возбудители гепатита – гепатотропные вирусы. Они проникают в клетки печени, встраиваются в их геном, нарушают структуру, приводят к некрозу ткани. В других органах приживаются редко. Вирусы не уничтожают печёночную клетку, а пользуются ею для размножения.

Иммунитет человека усиленно борется с вирусами, стараясь привести к их ослаблению и прекращению воспроизведения. Но чем сильнее борьба, тем больше погибает гепатоцитов. Это приводит к развитию воспаления (гепатит) и нарушениям функций печени.

При хорошем иммунитете печень самостоятельно может избавиться от вируса и победить недуг. Это случается при болезни типов А, Е и В. Если иммунная система проигрывает в борьбе, гепатит переходит в хронический (особенно при типах вируса С, D и реже В).

Выделяют пять видов заболевания:

  1. Гепатит А (возбудитель НАV). Путь передачи фекально-оральный. Нечистоплотность, немытые продукты и грязная вода – причины инфицирования. Иногда передаётся во время интимной близости. Часто имеет нетяжёлую форму и приводит к полнейшему выздоровлению с последующим формированием иммунитета. Редкие тяжёлые виды приводят к летальному исходу. Прививка проводится.
  2. Гепатит В (НВV). Попадает в организм через жидкий биологический материал (кровь, семенную жидкость) и ребёнку в момент появления на свет. При использовании бывшего в употреблении шприца при введении инъекционных препаратов (в зоне риска наркоманы). Через нестерильные и многоразовые инструменты в больничных учреждениях (по халатности персонала). Через вливание донорской крови без предварительной проверки. Есть вакцина.
  3. Гепатит С (НСV). Заражаются, как и при гепатите В. Вакцины пока не существует.
  4. Гепатит D (НDV) поражает только заражённых НВV. Из-за двойного натиска на печень увеличивается серьёзность недуга. Прививка от В защищает и от НDV.

Если вирусный гепатит длится долго и скрытно, это приводит к опасным и необратимым последствиям. Знание этого факта – стимул не упустить болезнь и своевременно принять меры.

Гепатит В

Гепатит В – патология печени воспалительного характера, появляющаяся из-за проникновения в орган вируса В. Болезнь опасна риском получить цирроз печени или онкологию органа.

Пути проникновения болезни:

  • использование бывшего в употреблении шприца при уколах;
  • через нестерильные и многоразовые инструменты в медицинских учреждениях (по халатности персонала);
  • использование без предварительной проверки донорской крови;
  • практика незащищённых половых контактов;
  • вертикальная передача от страдающей недугом мамы ребёнку.

Вовремя распознать болезнь и начать лечение поможет знание признаков заболевания:

  1. Приступы тошноты и позывы к рвоте.
  2. Потеря аппетита.
  3. Ощущение дискомфорта под рёбрами справа.
  4. Ноющие боли в суставах.
  5. Нарушения частоты и консистенции испражнений (фекалии бесцветные, моча тёмная).
  6. Появление желтушной окраски кожи.
  7. Вялость и быстро наступающая утомляемость.

Сегодня не существует медикаментов, до конца изгоняющих вирус из организма и полностью исцеляющих. Но если вовремя принять лечебные меры, обеспечить сохранность печени можно.



Что такое ДНК вируса гепатита b количественное определение

Обнаружить ДНК вируса гепатита В можно методом ПЦР (полимеразной цепной реакции). Заподозрить болезнь – по клинике, с помощью лабораторных и инструментальных методов. Вначале патология имеет скрытый характер (период инкубации), затем переходит в стадию обострения.

Со временем становится хроническим заболеванием, но это влияет численность вирусов и качество терапии. Очень важно не допустить последней стадии.

Существует качественный иммуноферментный анализ исследования на присутствие ДНК вируса. Но он не до конца объективен. При его проведении не обнаруживают присутствие болезнетворного патогена внутри органов.

Он помогает выявить:

  • как реагирует иммунитет на инфекцию;
  • есть ли в крови антигены и антитела.

Поэтому контроль терапии усложнён. Доказать, что человек выздоровел, на основании этого метода нельзя. Обнаруживают и выявляют не подтверждённую качественным анализом ДНК вируса гепатита В с помощью количественного анализа.

Такой анализ достоверен и назначается в следующих случаях:

  1. Иммуноферментный анализ (ИФА) на антитела положителен.
  2. Установлен факт наличия вирусной патологии печени.
  3. Есть вероятность нескольких видов гепатита.
  4. Если надо узнать, какова нагрузка вирусов на организм.

Если болезнь протекает легко и без осложнений, нет необходимости определения нагрузки вирусов. Пациента лечат на основании показаний ИФА.

Медицинской наукой разработан метод полимеразной цепной реакции (ПЦР).При помощи данного анализа определяют и присутствие ДНК вируса, и его количество в крови.

Выявление ДНК НВV методом ПЦР

Для выявления ДНК вируса гепатита B проводят ПЦР для подсчёта числа частичек НВV в единице объёма кровяной сыворотки. Показатель вируса гепатита считается нормальным при отсутствии двойника ДНК инфекта.

Такая диагностика имеет цель:

  1. Подсчитать число частиц вируса в единице объёма сыворотки.
  2. Подтвердить острый гепатит.
  3. Своевременно предотвратить переход недуга в хроническое состояние.
  4. Выявить носителей вируса с положительными результатами ИФА.
  5. Проследить возвращение вирусов после излечения.
  6. Принять верное решение о назначении терапии, её комбинировании или прекращении.

Пройдя инкубационный период, острый гепатит даёт положительный результат при ПЦР через семь-четырнадцать дней.

Перед назначением крови на анализ, доктор выясняет у пациента анамнез:

  • вводились ли в вену наркотики;
  • вливалась ли чужая кровь или сдавалась, как донорская;
  • не было ли операций;
  • были ли кожные повреждения;
  • не было ли сомнительных половых связей;
  • были ли контакты с инфицированными гепатитом В людьми.

Кровь берётся на анализ из вены на голодный желудок утром в период с 7 до 9 часов, чтобы результаты были достоверны.

К забору крови готовятся, соблюдая правила:

  • не есть в течение 12 часовжирной пищи,не принимать алкогольные напитки, не курить;
  • избегать физических и спортивных нагрузок;
  • предупредить в лаборатории, если принимались лекарства (по возможности избежать приёма);
  • детям до пяти лет за полчаса до забора крови выпивать по двести грамм кипячёной воды через десятиминутные промежутки.

Концентрацию ДНК ВГВ измеряют в копий/мл или me/мл.

В оценке результатов исследования ориентируются на следующие показатели:

  • < 2х10, что означает при расшифровке, что острая стадия не станет хронической;
  • от 2х104 до 2х106 – в тридцати процентах случаев станет хроническим;
  • >2х106 –в девяноста пяти процентах случаев станет хроническим.

Количественный ПЦР – главный метод диагностирования обострений гепатита В, выявления скрытого носителя инфекции с высокой виремией НВV.

При каких заболеваниях делается ДНК вируса гепатита b количественное определение

ПЦР анализ на гепатит производится для обнаружения инфекции (ДНК НВV). Этот вид диагностического выявления вредоносных микроорганизмов приходит на помощь не только при гепатите В. Чтобы найти скрытных и трудно обнаруживаемых в органах возбудителей, ПЦР часто применяют для подтверждения или опровержения инфекции в гинекологической и урологической практике.

Исследуя кровь, обнаруживают:

  • гепатиты А, В, С, D и ТТ;
  • ВИЧ-инфекцию;
  • патологии печени;
  • герпес всех видов;
  • цитомегаловирусы;
  • энтеровирусную инфекцию;
  • токсоплазмоз;
  • краснуху;
  • другие недуги, вызываемые вирусами.

Для диагностирования болезней этим методом подходит не только кровяная сыворотка. Другие биоматериалы тоже берутсядля анализа. Это слюна, мазки из половых органов, эякулят.

Следовательно, список болезней, при которых показана ПЦР-диагностика, расширяется:

  1. Туберкулёз.
  2. Сальмонеллёз.
  3. Дифтерия.
  4. Венерические недуги.
  5. Вирусные папилломы

ПЦР входит в ряд обязательных анализов для женщины, вынашивающей ребёнка. Чтобы не допустить патологического протекания беременности и отклонений в развитии малыша, надо исключить вероятность инфицирования матери опасными заболеваниями.

Срок выполнения анализа на ДНК вируса гепатита b количественным способом

ПЦР без ошибок с высокой точностью выявляет наличие вируса уже на ранней стадии. При исследовании методом ИФА антиген проявляется лишь спустя два месяца после заражения. При ПЦР – через тридцать дней. Выявляется не только обычный вирус, но и мутировавшие штаммы,что не может обнаружить никакой другой анализ.

Существуют стандартные цифры количественного показателя вируса. С ними сравнивают полученные при исследовании значения и делают выводы о степени развития болезни или её отсутствии. Данные анализа ПЦР выдаются через две недели.

Часто люди не знают, что переболели гепатитом B. Они путают его с простудой или гриппом. Из-за перенесённой болезни повышается риск в течение жизни приобрести серьёзные осложнения со стороны печени. Поэтому лучше перестраховаться и обратиться к инфекционисту.

К каким докторам следует обращаться для консультаций

Пациент, получив на руки результаты анализов, старается сам сделать выводы о наличии у него гепатита и определить стадию развития болезни. При этом часто допускается ошибка в оценивании реального положения вещей. Чтобы этого не было, приходят за консультацией к докторам.

Медицинские специалисты в этой области:

  1. Вирусолог.
  2. Гепатолог.
  3. Инфекционист.

Лечащим врачом анализ количественного ПЦР-теста расшифровывается, по результатуоцениваетсяхарактер течения гепатита В и показания к дальнейшей диагностике.

Помогает выбрать необходимое лечение или отменить его в случае отсутствия болезни у пациента.

Врач-инфекционист объективно оценит после расшифровки состояние здоровья пациента, назначит правильное лечение и даст консультацию.

Чтобы не получить проблем, связанных с этим недугом, гепатологи настоятельно рекомендуют ставить прививки от гепатита В. Введение вакцины – даёт стопроцентную гарантию, что человек будет ограждён от болезни.

Прививку делают:

  • всем младенцам сразу после появления на свет;
  • служащим медицинских учреждений;
  • тем, кому делается вливание чужой крови.

Сколько будет действовать введённая вакцина, зависит от иммунитета каждого человека в отдельности (от 10 до 20 лет). Если надо, прививку делают повторно.

Источник: https://gepatit.su/gepatit/b/dnk-virusa

Исследования на вирус гепатита В (ИФА и ПЦР)

ПЦР гепатита B

Поверхностный антиген гепатита В в сыворотке крови в норме отсутствует.
Обнаружение поверхностного антигена (HBsAg) гепатита В в сыворотке подтверждает острое или хроническое инфицирование вирусом гепатита В.

При остром заболевании HBsAg выявляется в сыворотке крови в последние 1-2 недели инкубационного периода и первые 2-3 недели клинического периода.

Циркуляция HBsAg в крови может ограничиваться несколькими днями, поэтому следует стремиться к раннему первичному обследованию больных. Метод ИФА позволяет выявить HBsAg более чем у 90% больных.

Почти у 5% больных самые чувствительные методы исследования не обнаруживают HBsAg, в таких случаях этиология вирусного гепатита В подтверждается наличием анти-HBсAg JgM или ПЦР.

Концентрация HBsAg в сыворотке крови при всех формах тяжести гепатита В в разгар заболевания имеет значительный диапазон колебаний, вместе с тем имеется определенная закономерность: в остром периоде существует обратная связь между концентрацией HBsAg в сыворотке и тяжестью болезни.

Высокая концентрация HBsAg чаще наблюдается при легких и среднетяжелых формах болезни.

При тяжелых и злокачественных формах концентрация HBsAg в крови чаще низкая, причем у 20% больных с тяжелой формой и у 30% со злокачественной антиген в крови может вообще не обнаруживаться.

Появление на этом фоне у больных антител к HBsAg расценивается как неблагоприятный диагностический признак; он определяется при злокачественных формах гепатита В.

При остром течении гепатита В концентрация HBsAg в крови постепенно снижается вплоть до полного исчезновения этого антигена. HBsAg исчезает у большинства больных в течение 3 месяцев от начала острой инфекции.

Снижение концентрации HBsAg более чем на 50% к концу 3-й недели острого периода, как правило, свидетельствует о близком завершении инфекционного процесса. Обычно у больных с высокой концентрацией HBsAg в разгар болезни он обнаруживается в крови в течение нескольких месяцев.

У больных с низкой концентрацией HBsAg исчезает значительно раньше (иногда через несколько дней после начала заболевания). В целом срок обнаружения HBsAg колеблется от нескольких дней до 4-5 мес.

Максимальный срок обнаружения HBsAg при гладком течении острого гепатита В не превышает 6 месяцев от начала заболевания.

HBsAg может быть обнаружен у практически здоровых людей, как правило, при профилактических или случайных исследованиях. В таких случаях исследуют другие маркеры вирусного гепатита В – анти HBсAg JgM, анти- HBсAg JgG, анти HBеAg и изучают функцию печени.

При отрицательных результатах необходимы повторные исследования на HBsAg. Если повторные исследования крови в течение более 3 месяцев выявляют HBsAg, такого пациента относят к хроническим больным вирусным гепатитом В.

Наличие HBsAg – довольно распространенное явление. В мире насчитывается более 300 млн. носителей, а у нас в стране – около 10 млн. носителей.

Прекращение циркуляции HBsAg с последующей сероконверсией (образование анти-HBs) всегда свидетельствует о выздоровлении – санации организма.

    Исследование крови на наличие HBsAg применяется в следующих целях:

  1. для диагностики острого гепатита В:
    • инкубационный период;
    • острый период заболевания;
    • ранняя стадия реконвалесценции;
  2. для диагностики хронического вирусного гепатита В;
  3. при заболеваниях:
    • персистирующем хроническом гепатите;
    • циррозе печени;
    для скрининга и выявления больных в группах риска:
  • больные с частыми гемотрансфузиями;
  • больные с хронической почечной недостаточностью;
  • больные с множественным гемодиализом;
  • больные с иммунодефицитными состояниями, в том числе СПИДом.

Оценка результатов исследования

Результаты исследования выражаются качественно – положительный или отрицательный. Отрицательный результат исследования указывает на отсутствие HBsAg в сыворотке крови. Положительный результат – выявление HBsAg свидетельствует об инкубационном или остром периоде острого вирусного гепатита В, а также при хроническом вирусном гепатите В.

Антитела к ядерному антигену вируса гепатита В JgG (анти-HBcAg JgG)

В норме анти-HBcAg JgG в сыворотке отсутствует.
У больных анти-HBcAg JgG появляются в острый период вирусного гепатита В и сохраняются на протяжении всей жизни. Анти-HBcAg JgG – ведущий маркер перенесенного ВГВ.

    Исследование крови на наличие анти-HBcAg JgG применяются для диагностики:
  • хронического вирусного гепатита В при наличии HBs антигена в сыворотке крови;
  • перенесенного вирусного гепатита В.

Антиген «е» вируса гепатита В (HBeAg)

В норме HBeAg в сыворотке крови отсутствует.
HBeAg можно обнаружить в сыворотке крови большинства больных острым вирусным гепатитом В. Он обычно исчезает в крови раньше HBs-антигена. Высокий уровень HBeAg в первые недели заболевания или обнаружение его на протяжении более 8 недель дает основание заподозрить хроническую инфекцию.

Этот антиген часто обнаруживается при хроническом активном гепатите вирусной этиологии. Особый интерес к определению HBeAg связан с тем, что его обнаружение характеризует активную репликативную фазу инфекционного процесса. Установлено, что высокие концентрации HBeAg соответствуют высокой ДНК-полимеразной активности и характеризуют активную репликацию вируса.

Наличие HBeAg в крови свидетельствует о высокой ее инфекциозности, т.е. присутствии в организме обследуемого активной инфекции гепатита В, и обнаруживается только в случае присутствия в крови HBs-антигена. У больных хроническим активным гепатитом противовирусные препараты применяются только при обнаружении в крови HBeAg. HBeAg – антиген – маркер острой фазы и репликации вируса гепатита В.

    Исследование крови на наличие HBe-антигена применяется для диагностики:
  • инкубационного периода вирусного гепатита В;
  • продромального периода вирусного гепатита В;
  • острого периода вирусного гепатита В;
  • хронического персистирующего вирусного гепатита В.

Антитела к антигену «е» вируса гепатита В (anti-HBeAg)

Анти-HBeAg в сыворотке в норме отсутствует. Появление анти-НВeAg антител указывает обычно на интенсивное выведение из организма вируса гепатита В и незначительное инфицирование больного.

Эти антитела появляются в острый период и сохраняются до 5 лет после перенесенной инфекции. При хроническом персистирующем гепатите анти-НВeAg обнаруживаются в крови больного вместе с НВsAg.

Сероконверсия, т.е.

переход HBeAg в анти-НВeAg, при хроническом активном гепатите, чаще прогностически благоприятна, но такая же сероконверсия при выраженной цирротической трансформации печени прогноза не улучшает.

    Исследование крови на наличие анти-НВeAg применяются в следующих случаях при диагностике вирусного гепатита В:
  • установление начальной стадии заболевания;
  • острый период инфекции;
  • ранняя стадия реконвалесценции;
  • реконвалесценция;
  • поздняя стадия реконвалесценции.
  • диагностика недавно перенесенного вирусного гепатита В;
  • диагностика хронического персистирующего вирусного гепатита В.

Обнаружение вируса гепатита В методом ПЦР (качественно)

Вирус гепатита В в крови в норме отсутствует.
Качественное определение вируса гепатита В методом ПЦР в крови позволяет подтвердить наличие вируса в организме больного и тем самым устанавливает этиологию заболевания.

Данное исследование дает полезную информацию для диагностики острого вирусного гепатита В в инкубационном и раннем периоде развития заболевания, когда основные серологические маркеры в крови у пациента могут отсутствовать.

Вирусную ДНК в сыворотке крови обнаруживают у 50% больных при отсутствии HBeAg. Аналитическая чувствительность метода ПЦР составляет не менее 80 вирусных частиц в 5 мкл, прошедшей выявление ДНК пробы, специфичность – 98%.

Этот метод имеет важное значение для диагностики и мониторинга течения хронического ВГВ. Примерно 5-10% случаев цирроза и других хронических заболеваний печени обусловлены хроническим носительством вируса гепатита В. Маркерами активности таких заболеваний является наличие HBeAg и ДНК вируса гепатита В в крови.

Метод ПЦР позволяет определять в крови ДНК вируса гепатита В как качественно, так и количественно. Определяемым фрагментом в обоих случаях служит уникальная последовательность ДНК гена структурного белка вируса гепатита В.

    Обнаружение ДНК вируса гепатита В в биоматериале с помощью ПЦР необходимо для:
  • разрешения сомнительных результатов серологических исследований;
  • выявление острой стадии заболевания по сравнению с перенесенной инфекцией или контактом;
  • контроля эффективности противовирусного лечения.

Исчезновение ДНК вируса гепатита В из крови – признак эффективности терапии

Обнаружение вируса гепатита В методом ПЦР (количественно)

Этот метод дает важную информацию об интенсивности развития заболевания, об эффективности лечения и о развитии резистентности к активным препаратам.

Для диагностики вирусного гепатита методом ПЦР в сыворотке крови применяются тест-системы, чувствительность которых составляет 50-100 копий в пробе, что позволяет детектировать вирус при его концентрации 5 Х 103 -104 копий/мл.

ПЦР при вирусном гепатите В безусловно необходима для суждения о вирусной репликации.

Вирусную ДНК в сыворотке крови обнаруживают у 50% больных при отсутствии HBeAg. Материалом для выявления ДНК вируса гепатита В могут служить сыворотка крови, лимфоциты, гепатобиоптаты.

  • Оценку уровня виремии осуществляют следующим образом:
  • менее 2.105 копий/мл (менее 2.105 МЕ/мл) – низкая виремия;
  • от 2.105 копий/мл (2.105 МЕ/мл) до 2.106 копий/мл (8.105 МЕ/мл) – средняя виремия;
  • более 2.106 копий/мл – высокая виремия.

Существует зависимость между исходом острого вирусного гепатита В и концентрацией ДНК ВГВ в крови больного. При низком уровне виремии процесс хронизации инфекции близок к нулю, при средней – хронизация процесса наблюдается у 25-30% больных, а при высоком уровне виремии острый вирусный гепатит В чаще всего переходит в хронический.

Показаниями для лечения хронического ВГВ интерфероном-альфа следует считать наличие маркеров активной репликации вируса (выявление HBsAg, HBeAg и ДНК ВГВ в сыворотке крови в течение предшествующих 6 месяцев.).

Критериями оценки эффективности лечения служат исчезновение HBeAg и ДНК ВГВ в крови, что обычно сопровождается нормализацией уровня трансаминаз и долговременной ремиссией заболевания, ДНК ВГВ исчезает из крови к 5-му месяцу лечения у 60%, к 9-му месяцу – у 80% больных. Снижение уровня виремии на 85% и более к третьему дню от начала лечения по сравнению с исходным служит быстрым и достаточно точным критерием для прогнозирования эффективности терапии.

Источник: https://www.gepatit.ru/gepatit-b-analysis/

Пцр на гепатит в качественный

ПЦР гепатита B

ПЦР диагностика позволяет не только определить наличие вируса гепатита В в крови и его этиологию, но также оценить его активность. Выявление вирусной нагрузки особенно важно для подбора эффективного лечения, если она слишком высока, то вероятность выздоровления уменьшается. В чем суть метода полимеразной цепной реакции?

Суть ПЦР диагностики

 При гепатите проводят ПЦР, чтобы наверняка удостовериться в поставленном диагнозе. При помощи этого метода можно выявить ДНК вируса, а также определить его количество в крови.

ДНК вирус в крови методом ПЦР при гепатите можно выявить по окончании инкубационного периода, в это время на фоне повышенного уровня трансаминаз можно определить и HBsAg, после чего появляется HBeAg.

При качественном определении можно точно установить диагноз, есть гепатит или его нет. В норме в крови ДНК вируса должен отсутствовать. Количественный метод позволяет определить интенсивность развития болезни и размножение вируса.

Анализ имеет очень высокую чувствительность и достоверность. В качестве биологического материала берут венозную кровь. Благодаря современным технологиям, при ПЦР можно обнаружить вирус при концентрации 5×103-104 копий/мл в крови. По результатам анализа, зная норму, можно судить о вирусной нагрузке и поставить прогноз на лечение.

Важно! Именно ДНК вируса способствует развитию цирроза и других хронических заболеваний печени.

Обнаружение ДНК при помощи ПЦР необходимо в следующих случаях:

Сомнения при постановке окончательного анализа после сдачи анализов. Определение острой стадии болезни. Выявление скрытых форм гепатита. Оценка эффективности после прохождения противовирусной терапии.

Как расшифровать полученные после ПЦР диагностики результаты?

ПЦР количественный

По количественной оценке можно не только определить наличие вируса, но и узнать вирусную нагрузку, в случае если ПЦР покажет положительный результат.

Количественный метод необходим, чтобы узнать такую информацию:

Интенсивность развития заболевания. Эффективность лечения. Развитие резистентности к противовирусным препаратам.

Количественная оценка очень важна при постановке диагноза хронического гепатита. В этом случае все показатели будут находиться не в пределах нормы. Уровень трансаминаза будет повышен, индекс активности вируса более 4, а концентрация ДНК вируса более 105 копий ДНК/мл. Если концентрация вируса более низкая, а уровень трансаминаза находится в норме, то можно говорить о пассивном носительстве.

Перед назначением противовирусного лечения прохождение ПЦР диагностики, а именно количественного обследования, является обязательным условием, чтобы определить вирусную нагрузку.

Делают анализ каждые 3 месяца, и если вирусная нагрузка возросла в 10 раз, то можно говорить об устойчивости вируса к лечению.

Количественный анализ дает очень важную информацию, ведь можно определить, сколько в крови содержится ДНК возбудителя. Чем больше его количество, тем больше вирусная нагрузка и тем тяжелее состояние больного.

При снижении вирусной нагрузке после прохождения лечения, можно судить о его эффективности. В некоторых случаях ПЦР при гепатите является показанием к проведению дополнительного обследования, такого как биопсия печени. При повышенном уровне АЛТ проводится ПЦР.

Расшифровка анализов такая: если вирусная нагрузка более 105копий ДНК/мл, а уровень АЛТ превышает норму, но не более чем в 2 раза на протяжении полугода, то такой больной нуждается в биопсии. При сильном воспалении или фиброзе показано противовирусное лечение.

Если же уровень АЛТ превышает норму более чем в 2 раза при высокой вирусной нагрузке, то сразу назначают лечение без дополнительной диагностики.

Только хорошие специалисты смогут правильно расшифровать результаты количественного ПЦР.

ПЦР качественный

Качественный анализ позволяет определить наличие вируса гепатита в крови. В норме он должен отсутствовать. Благодаря этому методу можно точно установить диагноз.

Качественный ПЦР анализ дает 100% точный результат.

Ни один другой метод не дает настолько достоверных данных. В более чем половине случаев после прохождения диагностики выявляют ДНК вируса, при отсутствии антигена. Очень важно на начальном этапе заболевания установить диагноз.

Доказано, что если ДНК вируса гепатита В активно размножается в организме человека в течение двух месяцев, то болезнь приобретает хроническую форму. Если же начать бороться с вирусом уже в течение первых недель после инфицирования, то шансы на полное выздоровление очень велики.

Как происходит расшифровка полученных результатов обследования при помощи качественного метода?

Расшифровка анализа очень проста:

В норме результат должен быть отрицательным, то есть ДНК вируса не обнаружено. Положительный результат свидетельствует о наличии гепатита.

Анализ помогает выявить вирус, определить его генотип и начать своевременное лечение. Очень часто при наличии ДНК наряду с качественной оценкой проводят и количественную.

Как подготовиться к обследованию?

При анализе на гепатит при помощи ПЦР диагностики берут кровь из вены. Проходить обследование лучше всего с утра, так как кровь всегда нужно сдавать натощак (после последнего приема пищи должно пройти не менее 8 часов).

Чтобы анализ был максимально достоверным, больной должен знать о некоторых факторах, которые могут повлиять на конечный результат:

Перед тем как сдавать кровь из вены, нужно 20 минут отдохнуть. Кроме того, что анализ сдается натощак, так, еще за 12 часов нельзя употреблять спиртное, курить, заниматься спортом и употреблять жирную еду.

Некоторые лекарственные средства, которые вынужден принимать больной, могут повлиять на конечный результат. Лаборант должен знать о случае медикаментозного лечения.

Если кровь нужно сдать ребенку в возрасте до 5 лет, то в таком случае его за полчаса до диагностики нужно поить каждые 10 мин. по стакану кипяченой воды.

Очень важно проходить ПЦР в клинике, которая хорошо себя зарекомендовала. Ведь несмотря на то что ПЦР определяет наличие вируса с точностью до 100%, этот показатель может снизиться до 95%, если учесть человеческий фактор.

Неквалифицированные лаборанты или плохая репутация клиники может стать причиной получения ложных результатов.

Рекомендуем прочитать:

ВГВ является сложноорганизованным ДНК-содержащим вирусом и относится к семейству Hepadnaviridae роду Orthohepadnavirus.

Гепатит В — антропонозная инфекция, преимущественно с парентеральным механизмом заражения, которая может протекать в форме вирусного носительства, острой и хронической форм и характеризуется поражением печени с возможным развитием острой печеночной недостаточности, хронического гепатита, цирроза печени и первичного рака печени (гепатоцеллюлярной карциномы).

Инфицирование организма человека происходит при непосредственном проникновении HBV в кровь (при каких либо инвазивных вмешательствах и при переливании крови и ее препаратов), или через слизистые и кожные покровы во время родов, при половых и тесных бытовых контактах. Попав в печень, HBV проникает в гепатоцит, где начинает интенсивно размножаться.

Развитие инфекционного процесса может происходить двумя путями: репликативным и интегративным. Репликативная форма инфекции ведет к развитию острого или хронического гепатита и циррозу печени, тогда как интегративная — к развитию «здорового» вирусоносительства, неактивного хронического гепатита, циррозу печени и первичной гепатокарциномы.

Серологическая диагностика и прогноз HBV-инфекции основан на выявлении антигенов вируса и антител к нему. Но, как оказалось, в популяции вируса гепатита В встречается достаточно мутантных штаммов (HBеAg-негативных), которые не улавливаются обычными серологическими тестами. Поэтому метод ПЦР для диагностики HBV-инфекции является крайне важным.

Источник: http://medic-sovet.ru/2017/10/28/pcr-na-gepatit-v-kachestvennyy/

Количественный анализ ПЦР на гепатит В: расшифровка, норма, ДНК

ПЦР гепатита B

ПЦР диагностика позволяет не только определить наличие вируса гепатита В в крови и его этиологию, но также оценить его активность. Выявление вирусной нагрузки особенно важно для подбора эффективного лечения, если она слишком высока, то вероятность выздоровления уменьшается. В чем суть метода полимеразной цепной реакции?

 При гепатите проводят ПЦР, чтобы наверняка удостовериться в поставленном диагнозе. При помощи этого метода можно выявить ДНК вируса, а также определить его количество в крови.

ДНК вирус в крови методом ПЦР при гепатите можно выявить по окончании инкубационного периода, в это время на фоне повышенного уровня трансаминаз можно определить и HBsAg, после чего появляется HBeAg.

  • При качественном определении можно точно установить диагноз, есть гепатит или его нет. В норме в крови ДНК вируса должен отсутствовать.
  • Количественный метод позволяет определить интенсивность развития болезни и размножение вируса.

Анализ имеет очень высокую чувствительность и достоверность. В качестве биологического материала берут венозную кровь. Благодаря современным технологиям, при ПЦР можно обнаружить вирус при концентрации 5×103-104 копий/мл в крови. По результатам анализа, зная норму, можно судить о вирусной нагрузке и поставить прогноз на лечение.

Важно! Именно ДНК вируса способствует развитию цирроза и других хронических заболеваний печени.

Обнаружение ДНК при помощи ПЦР необходимо в следующих случаях:

  1. Сомнения при постановке окончательного анализа после сдачи анализов.
  2. Определение острой стадии болезни.
  3. Выявление скрытых форм гепатита.
  4. Оценка эффективности после прохождения противовирусной терапии.

Как расшифровать полученные после ПЦР диагностики результаты?

Люблю жить!
Добавить комментарий